前言&苍产蝉辫;2002 年，瑞典国家食品管理局和斯德哥尔摩大学的研究人员发现，马铃薯和谷类制品，&苍产蝉辫;如薯片、薯条、烤土豆、面包、早餐麦片和饼干中的丙烯酰胺含量可高达&苍产蝉辫;3 毫克/公斤。&苍产蝉辫;高碳水化合物食品在高温&苍产蝉辫;(>120 °C) 条件下会产生丙烯酰胺，如油炸、烘烤和挤压&苍产蝉辫;(1)。对&苍产蝉辫;于动物，它是的一种神经毒素和致癌物质。国际癌症研究机构(IARC)认为它可能使&苍产蝉辫;人致癌&苍产蝉辫;(2)。高浓度的丙烯酰胺主要存在于马铃薯制品，面包和谷物产物，以及咖啡中。丙&苍产蝉辫;烯酰胺是在食品进行高温处理时生成的,产生原因是某些氨基酸与还原糖发生了美拉德反&苍产蝉辫;应&苍产蝉辫;(Maillard) (1)。大多数实验室使用液相色谱/叁重四极杆质谱&苍产蝉辫;(LC/ MS / MS) 检测食品&苍产蝉辫;中的非衍生丙烯酰胺。液相色谱方法采用水提取食品中的丙烯酰胺。用正己烷、甲苯或&苍产蝉辫;环己烷除去脂肪，然后对水相进行离心&苍产蝉辫;(3)。根据美国食品药品管理局&苍产蝉辫;(FDA) 的方法，使用&苍产蝉辫;固相萃取&苍产蝉辫;(SPE) 进行样品的净化&苍产蝉辫;(4)。

QuEChERS 方法最早用于食品中农药残留的分析，后来被&苍产蝉辫;Mastovska 和&苍产蝉辫;Lehota 修改之后，可用于食品中丙烯酰胺的提取&苍产蝉辫;净化&苍产蝉辫;(5)。方法包括两个主要的步骤：提取和分散固相萃取净化。用&苍产蝉辫;水提取样品，正己烷除去脂肪，氯化钠促使乙腈和水相&苍产蝉辫;分层，使丙烯酰胺进入乙腈中。取一定体积的有机相用分散固相&苍产蝉辫;萃取进行净化，利用&苍产蝉辫;N-丙基乙二胺&苍产蝉辫;(PSA) 去除有机酸，除去有机相中的水。最后用叁重串联四极杆液质联用仪的正离子&苍产蝉辫;多反应监测模式&苍产蝉辫;(MRM) 进行样品的分析。&苍产蝉辫;本应用简报介绍了用&苍产蝉辫;LC/MS/MS 检测炸薯条中丙烯酰胺的方法。&苍产蝉辫;方法包括采用安捷伦&苍产蝉辫;Bond Elut QuEChERS 提取试剂盒&苍产蝉辫;(p/n 5982-5850) 和&苍产蝉辫;Bond Elut AOAC 分散固相萃取&苍产蝉辫;2 mL 试剂盒&苍产蝉辫;(p/n 5982-5022) 进行样品前处理。

实验部分&苍产蝉辫;试剂和化学品&苍产蝉辫;所有的试剂都是&苍产蝉辫;Optima 或&苍产蝉辫;LC/MS 级的。乙腈、正己烷、甲酸和&苍产蝉辫;水都是从 Fisher Scientific (Hanover Park, IL, USA) 购买的。丙烯&苍产蝉辫;酰胺（图&苍产蝉辫;1）和同位素的&苍产蝉辫;13C3-丙烯酰胺（内标）是从&苍产蝉辫;Cambridge Isotope Laboratories (Andover, MA, USA) 购买的。&苍产蝉辫;标准溶液&苍产蝉辫;丙烯酰胺标准储备液&苍产蝉辫;(1 mg/mL) 用&苍产蝉辫;100 毫克丙烯酰胺溶于&苍产蝉辫;100 毫升的乙腈制备，并储存在&苍产蝉辫;4 °C 条件下。内标（甲基丙烯酰胺）&苍产蝉辫;储备液&苍产蝉辫;(100000 µg/mL) 用移液枪取&苍产蝉辫;0.5 mL 浓度为&苍产蝉辫;1 mg/mL 的&苍产蝉辫;标准溶液溶于&苍产蝉辫;50 毫升的乙腈制备，并储存在&苍产蝉辫;4 °C 条件下。所有的&苍产蝉辫;工作标液都是每天采用序列稀释法用乙腈新鲜配置的。

设备和材料&苍产蝉辫;样品分析是在安捷伦&苍产蝉辫;1200 系列液相色谱和&苍产蝉辫;6460 叁重串联四极杆液质联用仪上进行的&苍产蝉辫;(Agilent Technologies, Inc., CA, USA)。组分&苍产蝉辫;的分离采用&苍产蝉辫;C18 色谱柱&苍产蝉辫;(2.1 mm × 150 mm, 3 µm)，用安捷伦&苍产蝉辫;MassHunter 软件进行数据处理。&苍产蝉辫;用&苍产蝉辫;Bond Elut QuEChERS 丙烯酰胺提取试剂盒&苍产蝉辫;(p/n 5982-5850) 和安捷伦&苍产蝉辫;Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒&苍产蝉辫;(p/n 5982-5022) 进行样品的提取和净化。

样品制备&苍产蝉辫;冷冻炸薯条从当地的商店购买。&苍产蝉辫;提取&苍产蝉辫;称取&苍产蝉辫;1 克炸薯条放入&苍产蝉辫;50 毫升的安捷伦的&苍产蝉辫;Bond Elut QuEChERS 离心管中。加入内标（13C3 丙烯酰胺），浓度为&苍产蝉辫;500 ng/g。加入正&苍产蝉辫;己烷&苍产蝉辫;(5 mL) 并涡旋振荡。加入&苍产蝉辫;10 毫升水和&苍产蝉辫;10 毫升乙腈，然后是&苍产蝉辫;Bond Elut QuEChERS 提取混合物&苍产蝉辫;(p/n 5982-5850)。振荡&苍产蝉辫;1 分钟，&苍产蝉辫;在&苍产蝉辫;5000 转下离心&苍产蝉辫;5 分钟。

分散固相萃取净化&苍产蝉辫;弃去正己烷相，将&苍产蝉辫;1 毫升乙腈提取液转移至&苍产蝉辫;2 毫升&苍产蝉辫;Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取管中&苍产蝉辫;(p/n 5982-5022)。管中包含&苍产蝉辫;50 毫克的&苍产蝉辫;PSA，150 毫克的无水。振荡&苍产蝉辫;30 秒，然后在&苍产蝉辫;5000 转下离心&苍产蝉辫;1 分钟。上清液转移至自动进样器的样品瓶中用于&苍产蝉辫;液质分析。

结果和讨论&苍产蝉辫;色谱分析&苍产蝉辫;丙烯酰胺和甲基丙烯酰胺的分离是在&苍产蝉辫;C18 柱上进行的&苍产蝉辫;(2.1 x  150 mm, 3 µm)，采用等度洗脱，2.5% 的甲醇/97.5% 的&苍产蝉辫;0.1% 甲&苍产蝉辫;酸水溶液。柱温是&苍产蝉辫;30 °C，流速为&苍产蝉辫;0.2 mL/min。图&苍产蝉辫;3 为丙烯酰胺和&苍产蝉辫;甲基丙烯酰胺分离的典型的色谱图。

QuEChERS 方法&苍产蝉辫;正己烷用于去除样品中的脂肪。加入水以利于提取薯条中的丙烯&苍产蝉辫;酰胺。包含&苍产蝉辫;4 g MgSO4 和&苍产蝉辫;0.5 g NaCl 的&苍产蝉辫;QuEChERS 提取盐包用于&苍产蝉辫;提取&苍产蝉辫;1 克薯条中的丙烯酰胺。加盐的目的是促使乙腈和水更好地&苍产蝉辫;分层。分散固相萃取被用于样品的净化(5)。&苍产蝉辫;本应用中的&苍产蝉辫;QuEChERS 前处理步骤很简单。不再需要耗时、繁琐&苍产蝉辫;而且还可能导致回收率损失的固相萃取步骤。

线性&苍产蝉辫;线性校正曲线是用分析物的相对响应（待测物丙烯酰胺与内标物&苍产蝉辫;甲基丙烯酰胺的峰面积比值）对分析物的相对浓度（待测物丙烯&苍产蝉辫;酰胺与内标物甲基丙烯酰胺的浓度比值）作图建立的。丙烯酰胺&苍产蝉辫;的浓度范围为&苍产蝉辫;0 – 1000 ng/mL（图&苍产蝉辫;4）。线性度非常好&苍产蝉辫;(r2>0.9999)。

回收率和重现性&苍产蝉辫;浓度分别为&苍产蝉辫;50 和&苍产蝉辫;100 ng/mL 的丙烯酰胺加标的&苍产蝉辫;1:1 乙腈水溶液。&苍产蝉辫;每个浓度水平重复叁次(n=3)。用含有&苍产蝉辫;33 ng/mL 丙烯酰胺的薯条&苍产蝉辫;分别添加两个浓度水平的丙烯酰胺（100 和&苍产蝉辫;200 ng/mL）制备加标&苍产蝉辫;样品以及不加标的空白校正样品，这是因为很难找到空白的&苍产蝉辫;薯条样品。加标薯条样品的色谱图见图&苍产蝉辫;5。分析重复叁次(n=3)。&苍产蝉辫;表&苍产蝉辫;2 是丙烯酰胺的回收率和相对标准偏差。

结论&苍产蝉辫;基于安捷伦&苍产蝉辫;Bond Elut QuEChERS 的样品前处理方法用于丙烯酰&苍产蝉辫;胺的提取和净化，LC/MS/MS 用于定量分析，开发了简单快速&苍产蝉辫;的多残留分析方法，具有高回收率以及高重现性，这个方法可以&苍产蝉辫;用于监测食品中的丙烯酰胺。